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核酸适配体合成服务
泰克生物凭借着在抗体领域的多年研究经验,已成功构建了一套完善的适配体文库系统,并在此过程中积累了深厚的项目实践知识。泰克生物能够为客户提供卓越的核酸适配体文库构建服务,并支撑客户后续的适配体筛选、核酸适配体序列合成、功能验证,以及针对特定分子的药物开发等后续研究环节。泰克生物通过专业的核酸适配体序列合成服务,实现了序列的优化升级与功能上的显著增强。借助先进的适配体文库构建平台,泰克生物确保客户能够获取高效且精确的核酸适配体成果。此外,泰克生物还具备提供全方位适配体文库设计服务的能力,涵盖从基因分析合成、体外筛选适配体、适配体合成到亲和力测定的全过程,力求满足各类客户的多样化项目需求。
泰克生物构建的涵盖广泛不同序列的核酸适配体文库,覆盖范围较广。文库中的序列长度、GC比例及二级结构等核心要素都进行了优化,旨在丰富适配体的多样性,同时严格监控其品质。基于多年的项目经验,泰克生物深入剖析了筛选出的核酸适配体序列,提炼出这些序列共有的结构特点,进而持续优化序列设计,通过引入突变、调整序列长度等手段来增强适配体的结合效能、稳定性和生物活性。泰克生物的适配体文库容量约为10^13至10^14,甚至可达10^14级别。凭借这一高容量的文库以及多样化的筛选技术,如磁珠SELEX筛选、细胞SELEX筛选、捕获SELEX筛选等,泰克生物能够高效地从蛋白、小分子、细胞及细菌等多种样本中筛选出针对特定靶标的高特异性适配体序列,这些序列包括RNA、DNA及寡核苷酸等。基于获得的序列,进行核酸适配体序列合成,合成得到的核酸适配体展现出nM至pM级别的结合亲和力,特别是对蛋白靶标的亲和力可高达pM级别。客户只需明确实验需求,泰克生物的科研团队便会量身定制方案,全力协助客户的科研探索。
█ 核酸适配体合成服务
泰克生物采用先进的SELEX筛选技术,能够从庞大的随机文库中精确提取出对靶标具有高强亲和力的寡核苷酸。经过多轮筛选循环,再根据富集程度对SELEX片段进行测序,最终获得适配体序列。其中,寡核苷酸文库经过了独特的设计,其两端配置有固定的序列,而中间则巧妙地插入了随机序列。在固定序列部分,特别嵌入了有利于PCR扩增的引物结合位点。随机序列,通常由30至60个核苷酸构成,确保了文库的高度多样性,并使得这些序列能与靶标物质有效结合。文库设计的初始阶段对筛选效果起着决定性作用。固定区域的设计必须能防止在扩增时发生自我二聚化,因此,引物区的长度被精确控制在18到21个核苷酸之间。随机区域则一般位于30至60个核苷酸(nt)的长度范围内,而40nt是常用的长度。较短的随机区域设计便于后续的截短和应用,而较长的区域在适配体筛选技术中则更可能筛选出结构复杂、特异性强的适配体序列。单核苷酸分子能够对接识别靶分子上的高亲和性结合位点,结合位点上对接所得的核苷酸能够组装为短片段,作为核酸适配体的结合单元。以热稳定性好的二级结构(如迷你DNA发夹结构)为适配体的稳定单元,与结合单元共同组装成全长适配体。泰克生物构建文库与筛选适配体的详细流程参见图1。
图1 核酸适配体筛选流程图
█ 服务内容和周期
步骤 | 服务内容 | 周期 |
Step1:核酸适配体文库构建与筛选 | (1) 固定序列与随机序列的合成,体外构建适配体文库; (2) 生物素标记目标蛋白作为筛选靶点; (3) 适配体文库筛选与富集:PCR扩增富集+转录+跑胶回收,一般为6-10轮; (4) 筛选产物进行NGS测序; (5) 交付:适配体序列 5-15 条,实验报告,原始数据(包括NGS测序原始数据、胶图) | 10-15周 |
Step2: 适配体合成和亲和力测定(可选) | (1) 根据序列进行适配体合成; (2) 适配体与靶点蛋白进行亲和力测定,BLI或SPR,进行KD测定 (3) 交付:实验报告,原始数据 | 4-5周 |
█ 服务优势
多筛选靶点多样 | 文库库容庞大 | SELEX技术平台成熟 | 实验记录详尽可追溯 | 一对一个性化方案定制 | 筛选方式多样 | 筛选轮次充足 |
涵盖蛋白、多肽、氨基酸、小分子等多种类型 | 达到10^14量级,足以筛选出针对客户靶点的核酸适配体 | 筛选所得核酸适配体的亲和力可达nM至pM级别 | 遵循QC质控标准,提供中英文实验报告及原始实验记录 | 包括筛选方案以及后续的验证方案等,满足各类客户的科研项目需求 | 包括磁珠-SELEX、细胞-SELEX、捕获-SELEX等多种方法 | 经过6至10轮压力筛选,确保获得高亲和力、高特异性的核酸适配体 |
答:核酸适配体合成服务的优势在于其高稳定性、低成本和快速合成。与传统抗体相比,核酸适配体具有较高的热稳定性和化学稳定性,能够在苛刻的条件下保持活性。此外,核酸适配体合成无需动物免疫,避免了免疫反应问题,并且可以在短时间内合成大量高纯度的适配体,降低了生产成本。因此,核酸适配体广泛应用于诊断、药物递送和生物传感器等领域。
答:核酸适配体合成服务能够根据客户的具体需求定制化生产适配体,支持个性化的科研工作。无论是针对特定疾病的靶标还是特殊的应用场景,服务商可以根据筛选结果合成适配体,并根据需求进行进一步优化。此外,合成规模灵活,可以从小批量生产到大规模生产,帮助科研人员在不同阶段完成实验和应用,促进个性化医学和精准治疗的发展。
答:核酸适配体合成服务指的是通过化学方法合成短链DNA或RNA分子,这些分子能够特异性结合目标分子。核酸适配体广泛应用于分子诊断、药物开发、癌症治疗、环境监测等领域。在诊断中,它们作为生物传感器识别特定靶标,而在药物开发中,核酸适配体可用作靶向药物递送载体,增强治疗效果。其合成服务提供了定制化、快速且高效的解决方案,满足精准治疗与检测的需求。
答:核酸适配体的合成一般采用固相合成法或酶促合成法。固相合成法通过在固体载体上逐步合成核酸链,而酶促合成则利用酶催化反应合成核酸片段。通过优化反应条件、使用高质量原料、精细化的脱保护步骤,可以确保最终合成出具有高纯度和活性的适配体。此外,合成后的适配体通常还需要通过液相色谱等方法进行纯化,保证其质量。
答:保证核酸适配体的高纯度和活性,首先要选择高质量的试剂和原料。固相合成过程中,精确控制每个反应步骤,确保核酸链的正确连接。合成结束后,使用液相色谱或凝胶电泳等纯化方法去除杂质。为了验证活性,还需通过亲和力测定等实验,确保合成的适配体能够有效与靶标结合,从而确保其在实际应用中的有效性。
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