重组片段抗体定制服务-泰克生物-酵母展示服务专家

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重组片段抗体定制服务

泰克生物专注于为客户开发高质量的靶向性药物抗体。为帮助客户进行高质量的成药性评价，搭建了以哺乳细胞为核心的体外重组表达平台，可为客户提供包含序列分析、linker设计、融合标签设计，高表达载体设计构建、表达方案设计优化、重组表达条件优化、抗体纯化等高质量的一站式重组抗体制备服务。

抗原结合片段（Fab）是抗体上与抗原结合的区域。它包含每条重链和轻链的一个恒定区和一个可变区。只有重链和轻链的可变区融合在一起形成单链可变片段（scFv），其大小只有Fab片段的一半，但保留了原有的特异性。另一种小抗体片段，单域抗体，又称域抗体、VHH、VNAR或sdAb，是一种由单个单体可变抗体结构域组成的抗体片段，缺少常规的轻链和重链的CH结构域。

泰克生物是一家专业的CRO服务提供商，能为我们的客户提供高质量的重组抗体表达服务，如scFv抗体片段、Fab抗体片段、sdAb单域抗体、重链抗体等重组抗体构建和表达服务，如图1所示。另外，泰克生物目前在建的5000平米的GMP研究中心，能够为各类工业客户提供批量的重组抗体生产服务。

片段抗体示意图-泰克生物.png

图1 片段抗体示意图

█ 片段抗体类型与特性

利用我们重组表达技术平台，泰克生物可为客户提供以下相关片段抗体重组表达服务，如表1所示。

表1 片段抗体类型

抗体类型	组分	分子量（kDa）	化合价	半衰期（h）
Fab	VH+CH1+VL+CL （轻重链利用二硫键连接）	50-55	单体	12-20
scFv	VH+VL	30	单体	2-4
sdAb	VHH	15	单体	0.5
Fc融合抗体	（抗体+CH2+CH3）*2	/	二聚体	/
di-scFv	scFv*2	60	二聚体	4-8

█ 抗体片段表达系统常用宿主

表达系统	菌株/细胞	特点
原核细菌（E.coli）	BL21	适用于VHH抗体，会影响亲和力
哺乳动物细胞	CHO-S	是实验室常用的细胞系，作为贴壁和悬浮培养生长良好，生产率高，是大规模培养和GMP程序的理想选择；可进行许多翻译后修饰以获得生物仿制药，显示出卓越的生物相容性和药物活性；适用于无蛋白、无动物生产、无血清培养条件，并具有更好的稳定性和安全性。
	CHO-K1
	Freestyle 293F	是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系，可以高效表达蛋白。
	Expi 293F	具有高度可转染行，展示出较高的蛋白表达水平，相比标准的悬浮适应293细胞，表现出更快速的细胞生长和更高的培养存活率。

█ 片段重组抗体表达服务

泰克生物是一家专业的嵌合抗体的构建与生产公司，拥有成熟的重组抗体哺乳表达平台，能为客户提供高质量的嵌合抗体表达定制服务。全套Gibco无血清哺乳细胞培养，配合来源清晰的293F，CHO悬浮细胞系，整个体系满足于不同客户对天然构象蛋白的体外重组表达需求。泰克生物为客户提供的全套高性价比研究服务满足GMP-like体系，包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定，动物源成分的质控，标准化细胞培养与转化操作流程等。

表2 嵌合重组抗体表达服务内容

步骤

服务内容

周期

Step1：基因克隆及载体构建

-- 扩增/鉴定基因片段或合成目的基因，插入哺乳动物细胞表达质粒；

-- PCR及测序检测确定亚克隆基因；

-- 交付：测序原始数据和实验报告

1-2周

Step2:瞬时蛋白表达

-- 重组质粒转染细胞(293F, CHO)瞬时表达+纯化；

-- SDS-PAGE和WB检测；

-- 交付：表达载体，克隆菌株，重组抗体，纯度>85%，实验报告

1–2周

注：Fab类型抗体，表达难度比较大，项目周期根据实际情况增加

泰克生物还可以为客户进行抗体人源化、CAR-T/CAR-NK先导序列设计及细胞杀伤验证等一站式技术服务，为客户的科研项目及药物抗体开发助力。

█ 抗体重组表达服务平台优势

详细的实验设计和论证

低内毒素水平：LAL检测法<0.1EU/ug

多重表达模式：稳定表达和瞬时表达

保证型的高质量服务：完整的文件追溯

体系，保证您的产品所有材料、试剂和

制备信息可追溯

重组片段抗体定制服务常见问题解答

什么是重组片段抗体，为什么要选择这种形式的抗体？

答：重组片段抗体（Recombinant Fragment Antibodies）是指由抗体的片段（如Fab、scFv、Fv等）构成的重组抗体。与传统的完整抗体（IgG）相比，重组片段抗体去除了抗体的恒定区域，仅保留可变区域，从而具有更小的分子量。这使得重组片段抗体具有一些独特的优点，比如更好的组织渗透性、更低的免疫原性以及更快的分子清除速率。在靶向治疗和诊断应用中，重组片段抗体能够更有效地进入肿瘤细胞或其他目标组织，因此在肿瘤免疫治疗、疫苗开发、病理检测等方面具有广泛应用。通过重组技术生产的片段抗体，能够实现更高的特异性和亲和力，从而在研究和临床应用中展现出更高的优势。
重组片段抗体与全长抗体相比，有什么主要的不同点？

答：重组片段抗体与全长抗体的主要不同点在于其结构和功能。全长抗体通常由两个重链和两个轻链组成，包含可变区和恒定区。恒定区对抗体的免疫功能（如ADCC、CDC等）起着重要作用，而片段抗体则只保留抗体的可变区部分，即抗原结合片段。这使得片段抗体体积小、结构简单，通常没有免疫效应功能，如没有激活抗体依赖的细胞介导的细胞毒性（ADCC）和经典的补体依赖细胞毒性（CDC）作用。片段抗体的优势在于其能够更好地渗透到组织或细胞内部，具有更快的血清清除速度，并且通常比全长抗体更低的免疫原性。此外，片段抗体适合用于精准医疗和靶向治疗，如癌症靶向药物和分子探针，而全长抗体则更多应用于需要免疫效应的治疗中，如感染和自身免疫性疾病的治疗。
重组片段抗体定制服务的优势是什么？

答：重组片段抗体定制服务相比传统的抗体制备方法具有多个优势。首先，片段抗体相比全长抗体更小，分子量较低，具有更好的组织渗透性，这对于肿瘤靶向治疗等需要快速渗透到细胞或组织的应用非常重要。其次，片段抗体由于去除了恒定区，降低了免疫原性，因此在临床应用中可能导致较少的免疫反应。此外，片段抗体的生产通常比全长抗体更加简单和高效，能够减少成本和时间。通过基因工程技术，可以对片段抗体进行优化，提高其亲和力、特异性等性能，从而为客户定制出更符合需求的抗体。最后，重组片段抗体在某些检测方法中（如免疫组化、免疫荧光等）表现出较强的特异性，能够用于高灵敏度的检测。
重组片段抗体定制服务是否支持多种表达系统？

答：是的，重组片段抗体定制服务通常支持多种表达系统，客户可以根据实际需求选择合适的系统进行抗体表达。常见的表达系统包括大肠杆菌系统、酵母系统、昆虫细胞系统以及哺乳动物细胞系统（如CHO细胞、HEK293细胞等）。不同的表达系统具有各自的优缺点。大肠杆菌系统是最常用的高效、低成本的表达系统，但可能无法完成复杂的糖基化修饰，适合表达简单的抗体片段。酵母系统能够提供一定的糖基化修饰，但表达水平不如大肠杆菌高。昆虫细胞系统通常用于需要一定程度糖基化修饰的抗体表达，尤其在多糖修饰要求较高的情况下。哺乳动物细胞系统能够提供复杂的糖基化修饰，适合高质量的重组抗体片段的生产。客户可以根据抗体的需求和应用场景选择合适的表达系统。
重组片段抗体定制服务中的质量控制包括哪些内容？

答：重组片段抗体定制服务中的质量控制环节非常重要，主要包括以下几个方面：首先，亲和力和特异性测试是质量控制的核心。通过ELISA、表面等离子共振（SPR）、免疫印迹（Western Blot）等方法，测试抗体片段对目标抗原的结合能力，确保其具有较高的亲和力和特异性。其次，纯度测试是确保抗体质量的关键，通过SDS-PAGE、HPLC等技术检测抗体的纯度，确保样品中没有杂质和不必要的蛋白质。第三，稳定性测试也是质量控制的一部分，需要评估抗体在不同条件下的稳定性，包括存储稳定性、冻融稳定性等。第四，免疫原性评估对抗体的临床应用至关重要，尤其是在治疗性应用中，需要确保抗体片段的免疫反应性较低。最后，活性测试也非常重要，通过细胞实验或动物实验验证抗体的功能活性，以确保其在实际应用中的效果。

什么是重组片段抗体，为什么要选择这种形式的抗体？

答：重组片段抗体（Recombinant Fragment Antibodies）是指由抗体的片段（如Fab、scFv、Fv等）构成的重组抗体。与传统的完整抗体（IgG）相比，重组片段抗体去除了抗体的恒定区域，仅保留可变区域，从而具有更小的分子量。这使得重组片段抗体具有一些独特的优点，比如更好的组织渗透性、更低的免疫原性以及更快的分子清除速率。在靶向治疗和诊断应用中，重组片段抗体能够更有效地进入肿瘤细胞或其他目标组织，因此在肿瘤免疫治疗、疫苗开发、病理检测等方面具有广泛应用。通过重组技术生产的片段抗体，能够实现更高的特异性和亲和力，从而在研究和临床应用中展现出更高的优势。
重组片段抗体与全长抗体相比，有什么主要的不同点？

答：重组片段抗体与全长抗体的主要不同点在于其结构和功能。全长抗体通常由两个重链和两个轻链组成，包含可变区和恒定区。恒定区对抗体的免疫功能（如ADCC、CDC等）起着重要作用，而片段抗体则只保留抗体的可变区部分，即抗原结合片段。这使得片段抗体体积小、结构简单，通常没有免疫效应功能，如没有激活抗体依赖的细胞介导的细胞毒性（ADCC）和经典的补体依赖细胞毒性（CDC）作用。片段抗体的优势在于其能够更好地渗透到组织或细胞内部，具有更快的血清清除速度，并且通常比全长抗体更低的免疫原性。此外，片段抗体适合用于精准医疗和靶向治疗，如癌症靶向药物和分子探针，而全长抗体则更多应用于需要免疫效应的治疗中，如感染和自身免疫性疾病的治疗。
重组片段抗体定制服务的优势是什么？

答：重组片段抗体定制服务相比传统的抗体制备方法具有多个优势。首先，片段抗体相比全长抗体更小，分子量较低，具有更好的组织渗透性，这对于肿瘤靶向治疗等需要快速渗透到细胞或组织的应用非常重要。其次，片段抗体由于去除了恒定区，降低了免疫原性，因此在临床应用中可能导致较少的免疫反应。此外，片段抗体的生产通常比全长抗体更加简单和高效，能够减少成本和时间。通过基因工程技术，可以对片段抗体进行优化，提高其亲和力、特异性等性能，从而为客户定制出更符合需求的抗体。最后，重组片段抗体在某些检测方法中（如免疫组化、免疫荧光等）表现出较强的特异性，能够用于高灵敏度的检测。
重组片段抗体定制服务是否支持多种表达系统？

答：是的，重组片段抗体定制服务通常支持多种表达系统，客户可以根据实际需求选择合适的系统进行抗体表达。常见的表达系统包括大肠杆菌系统、酵母系统、昆虫细胞系统以及哺乳动物细胞系统（如CHO细胞、HEK293细胞等）。不同的表达系统具有各自的优缺点。大肠杆菌系统是最常用的高效、低成本的表达系统，但可能无法完成复杂的糖基化修饰，适合表达简单的抗体片段。酵母系统能够提供一定的糖基化修饰，但表达水平不如大肠杆菌高。昆虫细胞系统通常用于需要一定程度糖基化修饰的抗体表达，尤其在多糖修饰要求较高的情况下。哺乳动物细胞系统能够提供复杂的糖基化修饰，适合高质量的重组抗体片段的生产。客户可以根据抗体的需求和应用场景选择合适的表达系统。
重组片段抗体定制服务中的质量控制包括哪些内容？

答：重组片段抗体定制服务中的质量控制环节非常重要，主要包括以下几个方面：首先，亲和力和特异性测试是质量控制的核心。通过ELISA、表面等离子共振（SPR）、免疫印迹（Western Blot）等方法，测试抗体片段对目标抗原的结合能力，确保其具有较高的亲和力和特异性。其次，纯度测试是确保抗体质量的关键，通过SDS-PAGE、HPLC等技术检测抗体的纯度，确保样品中没有杂质和不必要的蛋白质。第三，稳定性测试也是质量控制的一部分，需要评估抗体在不同条件下的稳定性，包括存储稳定性、冻融稳定性等。第四，免疫原性评估对抗体的临床应用至关重要，尤其是在治疗性应用中，需要确保抗体片段的免疫反应性较低。最后，活性测试也非常重要，通过细胞实验或动物实验验证抗体的功能活性，以确保其在实际应用中的效果。

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