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双特异性抗体开发服务

泰克生物一直致力于开发单克隆抗体,在抗体开发和工程抗体所需的平台方面拥有超过8年的经验,已经开发出了不同的抗体库,用于抗体筛选、抗体测序、抗体人源化等。泰克生物投资了尖端技术,使用复杂的工程、计算机3-D建模和合成生物学技术生产定制的双特异性抗体。从客户的需求出发,泰克生物可以帮助客户设计、开发和验证用于研究和临床前的双特异性抗体。

双特异性抗体(bsAbs)是抗体含有不同的表位(通常在两个单独的抗原表位)即两个抗原结合位点。通常,一种结合特异性针对靶细胞的特定细胞表面抗原,而另一种针对效应细胞表面上的“触发”分子,例如FcγR或CD3/T细胞受体复合物之一。

双特异性抗体可以超越效应细胞对其天然靶标的特异性,并将其重定向以杀死原本会忽略的靶标。不同的细胞毒性表达不同的触发分子(受体)。因此,通过改变靶标和效应子结合域的特异性,可以针对大多数类型的靶细胞产生多种效应子反应。或者,可以通过将一种结合特异性靶向血清免疫球蛋白来赋予全范围的效应子功能(即ADCC、吞噬作用、补体激活和延长的血清半衰期)。

目前,市场上有两种用于治疗的双特异性抗体。由于其不同的作用机制,双特异性抗体越来越受到关注,更多的双特异性抗体正在进行临床试验,不仅针对癌症,还针对其他疾病。


█ 如何制备双特异性抗体

 

泰克生物已经开发了许多方法来产生双特异性抗体。杂交瘤是较早用于生产双特异性抗体的技术。它基于表达所需特异性鼠 IgG 的两种不同杂交瘤细胞系的体细胞融合。然而,功能性双特异性抗体的真实百分比是不可预测的,并且需要复杂的过程来从副产物中分离双特异性抗体。

通过使用分子克隆技术,可以从同一生产细胞中表达两条不同的重链和轻链组装双特异性IgG抗体。双特异性抗体的生产需要至少两个用于异二聚化重链的质粒和一个用于共同轻链的质粒或两个轻链质粒(如果使用两条不同的轻链)。值得注意的是,建议在不同的质粒上表达HC 和LC,因为控制质粒比例是一种简单有效的方法,可以优化所需产品的蛋白质组装。随后,通常需要一个费力且耗时的过程来从异质稳定转染池中选择最理想的克隆细胞系,以进行大规模抗体生产。

与稳定转染相比,瞬时转染可以在几天内获得结果,而无需将重组 DNA 整合到宿主基因组中。人类胚胎肾 (HEK293) 和基于 HEK 的 Expi 293 细胞是用于瞬时表达的人类细胞,已在bsAb 开发的早期使用。


█ 服务内容

 

步骤

内容

基因合成

生成多达 3 个不同设计的序列,从头生成重组抗体 DNA 质粒

小试

双特异性抗体蛋白的产生小规模表达到哺乳动物细胞系中通过 SDS-PAGE验证通过ELISA与重组蛋白抗原的结合分析将克隆与亲本抗体进行比较。

鉴定

 2 个全长双特异性抗体的表达通过ELISA进行结合分析抗小鼠抗体识别的抗体的ELISA评估。

生产

大规模抗体生产


█ 附加检测服务

 

步骤

内容

流式细胞仪分析

FACS与抗原阳性细胞系的结合分析

BLI 结合分析 

 通过 Octet 系统生物层干涉法进行抗体结合亲和力分析

Biacore TM SPR 生物传感 

使用 Biacore TM SPR 生物传感器进行结合和动力学分析以确定抗体亲和力、KaKdKD


█ 服务优势

 

-- CHO 细胞中的高蛋白表达

-- 非常稳定:在 37 °C 的血清中 >2 周

-- 无溶解度问题:> 30 mg/ml

-- 开发了许多不同的具有肿瘤抗原的稳定细胞系,以验证许多双特异性抗体

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双特异性抗体开发服务常见问题解答

  • F: 什么是双特异性抗体,它们在治疗中有什么特殊作用?

    Q: 双特异性抗体是一类能同时结合两个不同抗原的抗体。在治疗中,这种抗体通常用于精确靶向两个不同的病理标记,这在癌症治疗中尤其有价值,因为它可以同时阻断生长信号并引导免疫系统攻击肿瘤细胞。

  • F:开发双特异性抗体的主要技术挑战是什么?

    Q: 开发双特异性抗体面临的主要挑战包括保证其高亲和力和特异性,避免药物交叉反应,以及优化其生产过程以提高产量和纯度。此外,确保抗体的稳定性和减少免疫原性也是关键考虑因素。

  • F:在双特异性抗体的设计过程中,有哪些常用的技术平台?

    Q: 常用的技术平台包括单链Fv片段(scFv)融合技术、双特异性T细胞增强器(BiTEs)、和双价抗体平台等。这些技术各有优势,通常根据目标抗原的性质和所需的临床应用来选择合适的平台。

  • F:双特异性抗体的生产过程中有哪些关键步骤?

    Q: 生产双特异性抗体通常涉及基因工程、细胞线的建立、蛋白质表达和纯化等步骤。关键是要确保表达系统能够高效稳定地产生所需的重组抗体,并通过适当的纯化方法去除杂质和潜在的聚合体。

  • F:如何评估双特异性抗体的效果和安全性?

    Q: 评估双特异性抗体的效果和安全性通常包括体外细胞实验和体内动物模型测试。这些研究需要评估抗体的结合特性、杀伤活性、剂量依赖性、以及潜在的毒性和免疫反应。此外,临床前研究还需要遵循严格的监管指南来确保数据的准确性和可靠性。

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