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酵母双杂交（核系统）服务
泰克生物致力于为客户提供高质量的酵母双杂交服务，为客户的已知蛋白的互作验证、酵母双杂交文库的构建与筛选、基于酵母双杂交原理的多肽文库的构建和筛选、潜在互作蛋白/小分子多肽的发现和验证、以及小分子多肽靶向药物的开发等下游研发工作提供有力支持。泰克生物在酵母双杂交方面拥有多年的项目开发经验和心得，能够为客户提供各种定制化的酵母双杂交服务，包括但不限于蛋白互作验证、各类酵母双杂交cDNA文库（包括但不限于动物组织、植物组织、细胞等各类种属样本的cDNA文库）构建、随机多肽文库构建、靶向蛋白/小分子多肽的筛选等各类酵母双杂交服务。
酵母双杂交（Yeast two-hybrid, Y2H）是基于GAL4转录因子的DNA结合域（binding domain，BD）和转录激活域（active domain，AD）在空间上靠近时发挥转录因子活性，激活下游基因的转录和表达的原理，将BD蛋白基因和诱饵蛋白基因构建到同一载体上，AD蛋白基因和猎物蛋白基因构建到同一载体上，两个载体转入同一酵母菌株，若两个蛋白互作使BD和AD靠近即可激活下游基因的表达。基于这一原理，泰克生物建立了基于酵母双杂交的蛋白互作验证平台（由于该体系为体内的互作验证，蛋白的空间构象更接近于天然构象，结果更加真实可靠）、酵母双杂交cDNA文库构建/随机多肽文库构建与筛选平台（可发现众多天然的、潜在的互作蛋白/多肽小分子）。泰克生物构建的酵母双杂交cDNA文库/多肽文库的库容可达10^6-10^7，文库多样性、插入率均可达90%以上，满足各类客户对于酵母双杂交文库的质量要求。同时，泰克生物还能提供酵母双杂交文库构建与筛选的配套的下游表达验证和亲和力测定验证等一站式技术服务，客户只需要提供具体的靶蛋白序列信息、需要构建的文库种类以及样本信息，泰克生物的科学家均能够根据客户的需求进行合理的方案设计和个性化定制，为客户的科研项目及靶向互作蛋白/小分子多肽的发现助力。
█ 酵母双杂交服务
泰克生物建立了完善的酵母双杂交体系，能够提供各种高质量的定制化的酵母双杂交服务，包括但不限于各类种属样本cDNA文库构建与筛选、基因组DNA随机多肽文库构建与筛选、预制随机多肽文库构建与筛选、已知蛋白互作验证、未知互作蛋白验证及发现等，满足不同客户的科研需求。酵母双杂交文库构建服务流程如图1所示。
图1酵母双杂交文库构建服务流程
█ 服务内容和周期
步骤 | 服务内容 | 周期 |
酵母双杂交（核系统）文库构建 | 1) 总RNA提取； 2) 高保真RT-PCR制备cDNA； 3) 载体构建与转化：载体构建（cDNA连接酵母双杂交载体：融合AD）+电击转化酵母菌株； 4) 涂板挑取阳性克隆+阳性克隆PCR扩增（跑胶鉴定）+文库NGS测序； 5) 交付：酵母文库质粒1管（>300ug），酵母文库甘油菌3-5ml，实验报告 | 4-6周 |
酵母双杂交（核系统）文库筛选 | 1) 自激活验证； 2) 诱饵质粒与文库质粒共转酵母菌株； 3) 酵母筛选； 4) 筛选结果测序+回转验证； 5) 交付：实验报告、测序原始数据 | 7-9周 |
█ 服务优势
-- 多种种属样本可选：新鲜的动物组织样本、植物组织样本、细胞样本或各类样本的total RNA（需保证RNA不降解）等
-- 多种酵母双杂交文库可选：各类种属样本的cDNA酵母双杂交文库构建、基因组随机多肽酵母双杂交文库构建、预制随机多肽酵母双杂交文库构建
-- 酵母双杂交技术成熟：酵母双杂交文库库容可达10^6-10^7，插入率和多样性均>90%
-- 高标准交付：酵母双杂交文库质量保证，为客户的下游实验提供有力支持
-- 实验记录可追溯：文库QC质控标准（库容、多样性、插入率），中英文实验报告，原始实验记录
-- 可提供一系列配套的下游实验服务，文库筛选、蛋白/多肽表达验证以及亲和力验证等
-- 一对一个性化方案定制，根据客户需求设计最佳的构建和筛选方案（如：文库构建方法的选择（包括但不限于SMART技术、Gateway技术等）、载体构建设计、文库筛选及自激活验证方案设计等），满足各类客户的科研项目需求
-- 一站式服务：从方案设计、RNA提取、cDNA制备、载体构建、菌株转化及筛选验证等一站式技术服务
酵母双杂交（核系统）服务常见问题解答
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