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抗体改造与修饰平台

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抗体人源化服务

泰克生物多年来致力于噬菌体展示技术和抗体领域研究,拥有丰富的抗体工程构造经验和成熟的抗体人源化技术。基于噬菌体展示技术平台,泰克生物能够提供高亲和力和低免疫原性的嵌合抗体改造服务,并且能对抗体序列进行人源化改造并确保改造后的人源化抗体亲和力能与人源化之后的抗体维持在同一数量级水平,为客户的后续项目研究带来便利。


图2.png

图1 基于噬菌体技术平台的驼源VHH抗体发现服务


抗体人源化和抗体表征可以降低源自异种来源的单克隆抗体的免疫原性,同时保留亲本异种来源的单克隆抗体的亲和力和特异性,通过DNA重组技术和蛋白质工程技术,用人类抗体框架替换非人类抗体框架以提高它们对人类免疫系统的激活能力,这是治疗性抗体发现过程中非常重要的一步。为进一步减弱人源化抗体的免疫原性,泰克生物利用丙氨酸突变以及联合位点直接突变技术进行抗体超变区CDR高通量筛选,以进行人源氨基酸替换。目前为止,泰克生物已经成功为客户提供了上百种抗体人源化服务。

泰克生物致力于打造完善的一站式抗体人源化技术服务平台,为客户提供从生物信息学分析,人源化抗体设计,高表达载体构建,抗体表达及纯化,亲和力测定,到抗体体外验证(包含阻断验证),抗体亲和力成熟等一系列相关服务,以满足不同客户的需求。



█ 抗体人源化优点

 

(1) 降低机体的免疫排斥反应;

(2) 体内的半衰期较非人源化抗体变长,改善了抗体药代动力学;

(3) 更有效地募集机体效应因子或效应细胞;

(4) 抗体亲和力和特异性与人源化之前相当。


█ 抗体人源化服务内容

 

泰克生物能够提供以下三类人源化抗体定制服务:


类型

特点

改型抗体

将非人源抗体CDR区域移植到缺少CDR区域的人源抗体,如将鼠源抗体的CDR移植到人抗体支架中,使人源抗体获得鼠源单抗的抗原结合特异性,同时减少其异源性

嵌合抗体

利用DNA重组技术,将非人源抗体的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中,转染哺乳动物细胞进行重组抗体表达

全人源化抗体

利用基因编辑技术,将动物体细胞中抗体基因进行人抗体基因替换,动物免疫后直接产生全人源化的抗体


图2.jpg


杂交瘤测序


客户需提供两管杂交瘤细胞(5×106个/管,冻存液冻存,细胞活率>90%)。泰克生物将通过RACE制备mRNA并制作与重链和轻链相对应的cDNA,为客户提供可变区、天然分泌信号和抗体同种型亚类的序列。


重组抗体表达


泰克生物可根据客户的具体需求获取可变区域的序列并将它们转化为真正的分子。可变区可以与原始恒定区或新恒定区组合以产生人源化或同种型转换抗体。泰克生物可应用现有的设计平台来优化表达和平衡链比率,从而更大限度地提高功能性抗体的产量。

泰克生物提供一系列分析服务来分析客户的抗体的特性、亲和力、纯度、数量和质量。包括使用 ForteBio Octets 进行滴度和亲和力测量的生物层干涉测量法、通过尺寸排阻色谱法进行的聚集检测、通过qPCR机器测量的熔解温度和抗体稳定性、通过HPLC进行聚糖分析和使用质谱法进行分子质量测定。


抗体人源化


泰克生物通过计算机建模方法来将某些框架残基随机化到CDR嫁接,嫁接的CDR被克隆到噬菌体展示文库,通过筛选该噬菌体文库,筛选出亲和力较好的人源化抗体。为了进一步降低CDR移植的人源化抗体的免疫原性,泰克生物可以通过特异性决定残基(SDR)移植来更大限度地减少鼠源的含量。除此之外,泰克生物还可以从我们预制的人源抗体库中直接筛选得到人源抗体。

 

除以上传统抗体人源化的的方法之外,泰克生物还基于噬菌体展示技术平台和酵母展示平台,为客户提供抗体深度人源化服务



█ 服务内容

 

交付

周期

嵌合抗体构建

5种人源化抗体变体及基因序列信息;

至少 1 个人源化抗体变体具有与亲本抗体相当的结合亲和力;

实验报告

16-20周

抗原抗体结合分析

抗体模型库构建

噬菌体展示抗体文库构建

抗体高通量筛选

人源化抗体检测生产


█ 抗体人源化服务优势

 

-- 拥有深厚的抗体人源化专业知识科研团队,成功研制多个人源化抗体

-- 灵活的人源化抗体制备策略,针对客户需求进行一对一方案定制

-- 高亲和力和高特异性人源化抗体开发

-- 高通量筛选与灵活的文库淘筛策略

-- 拥有自主研发的高表达载体

-- 从生物信息学分析,人源化抗体设计,抗体表达及纯化,到亲和力测定,抗体亲和力成熟等一系列服务

-- 专注于提供具有强大可制造性的人源化抗体,从而实现临床使用所需的优化大规模生产


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抗体人源化服务常见问题解答

  • 抗体人源化过程中,人源化后的抗体在宿主系统中的表达水平较低,导致产量不足。

    优化表达载体的构建,包括选择适当的启动子、信号序列、选择合适的宿主系统等;优化培养条件,如温度、培养基成分、氧气供应等,提高表达水平;考虑使用增强剂或表达辅助剂,提高抗体的表达效率。

  • 人源化过程可能影响抗体的结构或活性,导致其功能不完整或无法正常表达。

    对人源化后的抗体结构进行优化设计,确保其正确的构象和功能;通过结构预测和分析,评估人源化抗体的活性和稳定性;进行功能性验证,确认抗体的活性和特异性。

  • 人源化过程中,可能会遇到人源化效率低的情况,导致部分抗体无法成功人源化。

    优化人源化策略,包括选择适当的人源化技术和方法,提高人源化效率;优化人源化后的抗体筛选和验证流程,确保人源化后的抗体满足预期的性能和功能要求。

  • 人源化过程中,抗原的选择和设计可能影响人源化抗体的结合效率和特异性。

    优化抗原的设计和表达,确保其与人源化抗体的结合效率和特异性;进行前期抗原评估和筛选,选择最适合的抗原;考虑使用亲和改良或结构优化等方法,提高抗体与抗原的结合效率和特异性。

  • 在抗体亲和力成熟过程中,选择合适的筛选方法可能会受到限制。

    结合抗体特性和研究目标,选择适合的筛选方法;根据实验条件和资源情况,权衡不同筛选方法的优缺点,确定最适合的筛选方案;利用多种筛选方法相互验证,提高筛选结果的可靠性。

立即咨询抗体人源化服务

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