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噬菌体展示抗体库技术

噬菌体展示抗体(PDA)库是分离单克隆抗体的另一种工具,这项技术在世界范围内被广泛用于抗体的研究和开发,产生了80多种进入临床试验的抗体。该技术涉及创建可变重链和轻链抗体库的大组合配对,并将其与噬菌体表面的一个外壳蛋白融合表达。许多抗体可以从单个文库中识别出来,进一步表达并在原核表达中产生。

 

一、噬菌体展示抗体库的优势


由于噬菌体的健壮性和高稳定性,该技术比其他隔离技术具有优势。噬菌体可以承受变性剂、pH、高温、紫外线和其他因素的极端条件,如非水溶液、蛋白水解酶等。具有该特征可分离出不同种类的抗体,这些抗体是稳定的或受恶劣环境影响最小。因此,在噬菌体展示技术中,条件和选择压力可以根据要求进行调整,并且可以掌握在活抗体产生中不可能的选择方法。

 

二、不同抗体类型的特征


抗体类型

大小(kDa)

抗体结合部位

(化合价)

Fc介导的功能

IgG

150

2

ScFv

28

1

×

Fab

50

1

×

F(ab)2

110

2

×

ScFv-Fc

110

2

Diabody

55

2

×

VHH

15

1

×

 

三、噬菌体展示抗体库—免疫文库


免疫噬菌体文库是由IgG基因的信使核糖核酸构建的。这些免疫文库富含抗原特异性抗体,它们易于识别某些靶标或抗原。从同一免疫库中可以分离出大量针对不同表位的具有不同特异性的抗体。免疫噬菌体文库可以从感染的患者、感染康复的个体或从接种个体的外周血单核细胞(PBMC)、骨髓、淋巴结、脾脏或脾脏等构建。从这些个体构建免疫噬菌体文库的一个主要优点是,可以直接从这些文库中分离出具有非常高有限性的结合物,并且可以直接用于不同的治疗应用。由这些个体构建的单个免疫文库也可用于分离针对同一病原体的多个表位/靶标的抗体,有时还可用于分离不同病原体的抗体。

由于与人类免疫相关的伦理问题,可以通过免疫表达人类抗体库的转基因动物(异种小鼠)来克服这个问题。这些动物的B细胞产生类人抗体。这些小鼠的mRNA可以直接用于构建免疫文库。这些免疫文库的主要优点是产生的抗体将具有非常高的质量和高亲和力。在活体内,免疫应答可以在体外以免疫噬菌体文库的形式复制。这些噬菌体文库可用于分离针对次要或局部免疫原性区域的抗体。免疫文库的大小相对较小,因为免疫系统已经编码了靶抗原;因此,可以从这样的文库中分离出大量具有所需亲和力的抗体。免疫文库的主要缺点是它需要免疫,有时引发的免疫反应要么是不可预测的,要么是不可逆的。

 

泰克生物生物搭建了完整的抗体平台,我们既拥有成熟的杂交瘤技术,也能利用噬菌体展示抗体库技术进行不同物种的单(多)克隆抗体制备,还提供抗体纯化,抗体标记,抗体人源化改造,亲和力测定等多样技术服务。

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