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噬菌体展示平台
泰克生物致力于为客户提供高亲和力、高特异性的抗体药物前期发现技术服务,为客户后续的CAR-T/CAR-NK先导序列设计、抗体人源化、药物靶点抗体开发、抗体偶联药物(ADC)开发、双特异性抗体开发以及高效阻断型中和抗体开发等下游研发工作提供有力支持。泰克生物在药物抗体发现方面拥有10年的项目开发经验和心得,能够为客户提供高质量的针对包括但不限于蛋白、多肽、小分子、病毒、膜蛋白以及mRNA等靶点的驼源VHH发现服务以及不同物种(兔源、鼠源、羊源和驼源等)scFv的发现服务。
噬菌体展示技术(Phagepro Tech®)是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,通常为M13噬菌体的P3蛋白,使外源基因随外壳蛋白的表达而展示到噬菌体表面的生物技术。基于噬菌体展示技术(Phagepro Tech®),泰克生物能够为客户提供高质量的包括但不限于VHH、scFv等单链抗体噬菌体展示服务,免疫文库库容为10^9-10^10(天然文库库容为10^10-10^12),文库多样性>90%、插入率95%、阳性率>95%等技术指标,满足不同类型客户对于抗体噬菌体展示文库的特殊要求。噬菌体展示的优势在于其展示纳米抗体文库中变异抗体基因的多样性,各个重组噬菌体(常用噬菌体为M13噬菌体)表面展示出不同的抗原结合域,相较于传统杂交瘤方法,噬菌体展示技术在抗体基因展示与筛选层面则具有非常突出的效率优势(如杂交瘤融合效率一般<0.4%,即1000次融合细胞中,大概4个融合子;而噬菌体展示轻松可以获得10^8-10^9个正确抗体序列)。同时,泰克生物还能提供抗体噬菌体展示配套的下游抗体体外验证(包括但不限于亲和力验证、抗体阻断验证、交叉反应验证等成药性评价验证实验)、抗体人源化、抗体亲和力成熟、CAR-T/CAR-NK先导序列设计及细胞杀伤验证等一站式技术服务,客户只需要提供具体的实验需求和靶点信息,泰克生物的科学家均能够根据客户的需求进行合理的方案设计和个性化定制,为客户的科研项目及药物抗体开发助力。
█ 基于噬菌体展示技术的抗体开发服务
基于噬菌体展示技术平台技术,泰克生物可为客户提供驼源VHH纳米抗体库,scFv抗体,Fab抗体等来自不同物种的抗体展示文库构建及筛选服务。其中VHH纳米抗体库,又称为驼源重链抗体文库,抗体分子量大小为15kDa,是驼源动物产生的特有的一种抗体,目前被广泛应用于CAR-T/CAR-NK治疗性抗体开发。scFv和Fab形式抗体则可来自小鼠,大鼠,羊,兔子,人源等宿主的PBMC细胞。从抗原准备到抗体活性验证,噬菌体展示发现路径如图1所示:
图1基于噬菌体技术平台的抗体发现通用流程
█ 噬菌体展示技术抗体开发服务类型
泰克生物为客户提供基于M13噬菌体展示体系的抗体发现服务,如图2或表1所示:
表1基于噬菌体展示技术的抗体发现类型
抗体形式 | 物种来源 | 噬菌体类型 | 抗体封装 |
scFv抗体形式 | 人 | M13 | TG1文库/噬菌体颗粒文库 |
鼠 | |||
兔 | |||
羊 | |||
Fab形式抗体 | 人 | ||
鼠 | |||
兔 | |||
VHH纳米抗体 | 羊驼 | ||
骆驼 |
图2基于噬菌体展示技术的抗体发现类型
█ 噬菌体技术平台服务优势
物种适应性广泛:人,鼠, 兔,羊,羊驼,骆驼,鱼等 物种的单抗开发均兼容 | 开发周期短:获得PBMC后, 建库到筛选获得抗体序列 4-6周 | 多种靶点抗体发现服务可选: 蛋白、多肽、小分子、病毒、 膜蛋白、mRNA等 | 文库库容大:免疫文库库容10^9 -10^10,天然文库库容10^10- 10^12 | 文库筛选方式灵活:固相筛 选、液相筛选、细胞筛选、 磁珠筛选等 |
基于噬菌体展示技术(Phage Display Technology),泰克生物能够为客户提供高质量的包括但不限于VHH、scFv等单链抗体噬菌体展示服务,且噬菌体文库库容可达10^8-10^9,文库多样性、插入率、阳性率均可达90%以上,满足各类客户对于抗体噬菌体展示文库的质量要求。
答:噬菌体展示技术(Phage Display)是一种通过将外源蛋白质或肽展示在噬菌体表面,从而进行筛选和鉴定目标分子(如抗体、肽、蛋白质等)与特定靶标相互作用的技术。它利用噬菌体作为载体,在噬菌体的表面展示多样化的蛋白库。通过将具有特定亲和力的蛋白或肽序列与靶标结合,可以筛选出高亲和力的分子。噬菌体展示技术广泛应用于抗体开发、药物筛选、疫苗设计和分子识别等领域,是生物制药和基础研究中的重要工具。
答:在噬菌体展示技术中,抗体筛选通常是通过构建一个多样化的抗体库,并通过与目标抗原的结合进行筛选。首先,将抗体基因克隆到噬菌体的基因组中,使得抗体的重链或轻链与噬菌体表面的外壳蛋白(通常是pIII或pVIII蛋白)结合,形成抗原-抗体复合物。接着,将包含目标抗原的固体表面(如微孔板或磁珠)与抗体展示的噬菌体相结合。通过洗脱未结合的噬菌体,剩余的噬菌体通过溶菌再生产和扩增。通过多轮筛选,可以从中挑选出具有高亲和力和特异性的抗体。
答:噬菌体展示技术的主要优势包括其高效性、灵活性、低成本和高通量。噬菌体展示可以在不需要纯化目标分子和繁琐实验的情况下进行高效筛选,且能够通过多轮筛选获得具有高亲和力和特异性的分子。此外,噬菌体展示技术能够在短时间内构建出大型多样化的文库,使得筛选过程具有高度的灵活性和多样性。此外,噬菌体展示技术的操作简单,成本低,能够广泛应用于抗体筛选、肽库筛选、疫苗开发等多个领域。
答:噬菌体展示技术广泛应用于抗体发现、药物筛选、疫苗研发、靶向治疗、分子识别和生物标志物的发现等多个领域。在抗体发现方面,噬菌体展示技术能够帮助研究人员筛选出与靶标具有高亲和力的单克隆抗体;在药物筛选中,噬菌体展示技术能够有效筛选出具有抗癌、抗病毒、抗细菌等作用的小分子;在疫苗开发中,噬菌体展示技术可以用于设计和筛选候选抗原,开发出高效的疫苗。在分子识别和生物标志物的发现上,噬菌体展示技术能用于筛选对特定细胞表面标志物具有高度特异性的肽或蛋白。
答:提高噬菌体展示技术的筛选效率主要通过优化筛选条件、提高文库的多样性和实施高通量筛选来实现。优化筛选条件包括使用合适的缓冲液、温度和pH值,以确保噬菌体能够与目标分子进行有效结合。提高文库的多样性是确保筛选得到高亲和力分子的关键,文库的多样性越大,筛选结果的可靠性也越高。高通量筛选技术(如流式分选技术)能够有效加速筛选过程,缩短筛选时间并提高精度。
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