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重组抗体表达服务
泰克生物专注于抗体重组表达多年,拥有专业的重组抗体生产团队,可为客户提供包含序列分析、linker设计、融合标签设计,高表达载体设计构建、表达方案设计优化、重组表达条件优化、抗体纯化等高质量的一站式重组抗体制备服务。抗体是免疫生物学研究过程中不可或缺的工具。重组抗体由于高批间一致性,低背景的特性,且具有良好地保护动物福利特性,越来受到广大科学家的重视。尤其,近年来随着抗体药物在抗肿瘤治疗领域的有效性被广泛认可,重组抗体越来越被各大医药公司所重视,这意味着重组抗体是抗体研究的未来。客户只需要提供抗体序列及项目需求,泰克生物的科学家可以高效的设计出重组抗体表达方案,配合完善的重组抗体表达体系,泰克生物能够提供各种高质量的重组抗体制备服务以满足不同客户的需求。
█ 什么是重组抗体/蛋白?
重组抗体(蛋白)是指利用获得的抗体(蛋白)氨基酸或碱基序列进行体外表达载体构建,转染到合适的宿主细胞,如293F,CHO细胞,进行表达后得到的抗体(蛋白)。来自噬菌体展示技术筛选、杂交瘤测序以及抗体全长测序获得的抗体序列均可以进行重组表达。泰克生物能够为客户提供高质量的重组表达服务,包括但不限于VHH、scFv、Fab及抗体融合蛋白,配合泰克生物自主设计的高表达载体、多个表达宿主体系(包括但不限于CHO-K1、CHO-S、Expi 293F、freestyle 293F等细胞系),多个规格的放大表达体系及完善的抗体纯化体系,泰克生物能够提供高质量、高校标准的重组抗体表达服务,并提供全程可追溯的文件体系配套服务。
█ 重组表达技术平台
为了配合高质量的抗体发现服务,泰克生物建立了一套完整的抗体体外哺乳重组表达和纯化及严格的QC控制体系。泰克生物的科学家均来自生物制药企业,拥有多年的人用抗体类药物开发经验,在深入学习和了解GMP规则下,严格按照QC质量控制体系,ICH和GMP指导原则进行重组抗体类产品的开发,并为客户提供个体化且高质量的重组抗体定制服务。
表1:重组表达服务内容
步骤 | 具体服务内容 | 周期 |
Step1:基因克隆及载体构建 | * 扩增/鉴定基因片段或合成目的基因,插入哺乳动物细胞表达质粒 * PCR及测序检测确定亚克隆基因 * 交付:测序数据和实验方案 | 1-2周 |
Step2:重组抗体瞬时表达 | * 重组质粒转染细胞(293F,CHO) :瞬时表达 * SDS-PAGE和WB检测 * 重组抗体纯化 * 交付:表达载体1支,克隆菌株1支,重组抗体0.02-5mg,纯度>90%(SDS-PAGE) | 3-4周 |
█ 泰克可提供的服务
利用我们重组表达技术平台,泰克生物可为客户提供以下配套服务:
重组蛋白293F/CHO细胞表达服务
全套Gibco无血清哺乳细胞培养,适用于科学家对天然构象抗体的体外重组表达需求。为客户提供的全套服务满足GMP-like体系,包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定,动物源成分的质控,标准化细胞培养与转化操作流程,全套的纯化填料和设备等准则进行生产的重组抗体。
嵌合抗体构建与生产服务
完全定制化的嵌合抗体构建,哺乳表达制备服务。无论您是完全从头开发亲本抗体序列还是已经拥有亲本抗体序列,您可以在泰克生物进行人-鼠嵌合抗体,人-兔嵌合抗体,鼠-兔嵌合抗体制备,人-羊驼嵌合抗体制备等,满足您个体化需求。具体信息,请参见 嵌合抗体构建与生产服务。
重组片段抗体构建和生产服务
片段抗体包括单链抗体scFV、VHH抗体(驼源纳米抗体)和Fab抗体等。客户可直接提供scFv、VHH序列或Fab序列,泰克生物可根据客户的需求设计不同种属的Fc片段融合抗体、不同的蛋白融合片段抗体(包含linker设计、载体选择、标签设计、融合表达的方案设计等)等重组表达方案,并进行重组表达和纯化获得高纯度产品。如客户仅有靶抗原信息,则可委托泰克生物进行动物免疫并筛选scFv和VHH抗体,泰克生物还能提供一系列配套的抗体改造(例如:抗体人源化、抗体亲和力成熟)和体外验证服务(抗体亲和力测定、抗体体外阻断验证等)。
█ 服务优势
-- 丰富的经验积累和完善的操作SOP
-- 多个表达宿主体系可供选择
-- 自主设计的高表达载体
-- 可提供抗体稳定表达细胞系构建服务
-- 拥有成熟的重组抗体表达平台,严格的质控体系,标准化的操作流程,提供高质量重组抗体产品
-- 一站式技术服务:从序列分析、方案设计、基因合成、载体构建、重组表达和纯化
-- 服务可定制:提供个性化定制服务满足客户的实际需求
-- 多种规格的放大表达体系
-- 完善的纯化体系和设备
-- 可提供配套的抗体体外验证服务
优化表达载体的构建,包括选择适当的启动子、信号序列、选择合适的宿主系统等;优化培养条件,如温度、培养基成分、氧气供应等,提高表达水平;考虑采用高效的转染技术或基因转染方法,提高细胞内抗体的转录和翻译效率。
优化抗体的结构设计,确保抗体的正确折叠和组装;选择适当的宿主系统和表达条件,促进抗体的正确折叠和组装;考虑使用分子伴侣等辅助蛋白质,协助抗体的正确折叠和组装。
优化培养条件,减少产生有害代谢产物或代谢产物积累的可能性;优化细胞培养基成分,提高细胞的抗毒性和耐受性;选择合适的细胞株和表达系统,减少毒性和死亡的发生。
优化纯化方法和步骤,选择适当的纯化柱、层析条件和洗脱缓冲液,提高纯化效率;采用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤等多种纯化方法的组合,提高抗体的纯度;进行质量控制和分析,确保纯化后抗体的质量和纯度。
优化抗原的设计和表达,确保其与重组片段抗体的结合效率和特异性;考虑使用亲和改良或结构优化等方法,提高抗体与抗原的结合效率和特异性。
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