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DNA免疫抗体制备服务

DNA免疫作为一种先进的技术方法能有效地诱导针对各种病原体的抗体和T细胞免疫应答，并且在免疫的动物或人血清中有效诱导高质量多克隆抗体应答，具有高度的构象特异性和高亲和力。与常规免疫方法不同，DNA免疫使宿主能够在体内产生具有常见转录后修饰的目的抗原，且该抗原较大限度地保持原始结构，绕过了耗时的免疫原（例如肽和重组蛋白）合成和纯化过程。DNA免疫特性有助于产生针对靶抗原自然构象的高亲和力抗体，这也是开发治疗性抗体的关键特征。同时，这种方法也是开发针对膜蛋白或其他具有挑战性抗原和抗体的理想方案。此外，DNA免疫也是免疫治疗及DNA疫苗开发早期阶段的一种新工具。

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泰克生物能够为客户提供多种抗原（包括但不限于PTM蛋白、细胞内蛋白、分泌蛋白）的DNA免疫抗体制备服务。基于杂交瘤的融合与筛选技术的抗体药物制备服务平台，泰克生物能够为客户提供一系列跟治疗性生物大分子免疫抗体制备相关的服务，包括但不限于VHH纳米抗体，scFv抗体，Fab抗体，DNA免疫抗体等制备服务。经过10年的发展，泰克生物建立了完善的杂交瘤融合与筛选平台，具备为客户提供一系列基于杂交瘤的融合与筛选技术平台的高质量DNA免疫抗体制备服务的实力。此外，泰克生物拥有包括从基因合成与修饰、AAV载体构建、动物免疫、杂交瘤细胞的融合与筛选、抗体生产等一站式技术服务，并且有配套的抗原抗体结合分析、抗原抗体BLI亲和力测定、抗体细胞系验证、等许多下游配套服务，为客户的抗体药研发与生产提供有力的支撑。

█ DNA免疫诱导免疫应答机制

诱导机制	具体内容
直接转染体细胞	将外源DNA分子直接转入到动物体内，肌肉细胞将激活产生MHC I类分子，从而诱导机体免疫应答
直接转染专职抗原递呈细胞	少量的专职APCs可在注射部位直接被转染，产生内源性蛋白，经MHC I和MHC II分子完全内源性抗原的递呈。
类似凋亡机制	目的抗原或者表达目的抗原的重组质粒序列本身具有转导特性。

█ DNA免疫的递送方式

传递方式	靶向抗原类型
基因枪	单次跨膜蛋白
	胞内蛋白
	病毒外壳蛋白
肌肉注射	细菌毒素
	7次跨膜蛋白
	病毒外壳蛋白
	分泌蛋白，酶
皮内注射	单次跨膜蛋白
	细胞外基质和血浆
	糖蛋白
肌肉注射之后电脉冲刺激	7次跨膜蛋白
肌肉注射之后电脉冲刺激	细菌毒素
皮内注射之后电脉冲刺激	跨膜蛋白、细胞内蛋白等
水动力静脉注射	多次跨膜转运蛋白

█ DNA免疫诱导生产单抗的优点

-- DNA免疫同时刺激体液免疫和细胞免疫, 加快抗原特异性B淋巴细胞的成熟, 从而可诱导产生有效识别靶点抗原表位的高特异性抗体。

-- 将目的基因直接导入到宿主细胞内得以表达, 因此可以避免蛋白质天然构象和免疫原性因外界因素的干扰而受到影响。

-- 在应用过程中按照自己的实际需要可以设计多种不同的免疫策略, 也可以选择符合靶点抗原特异性的候选方案。

-- 比传统的免疫方法更安全、操作简便、经济且可靠, 为制备高质量单克隆抗体提供良好的技术平台。

█ DNA免疫服务流程（以病毒为载体，羊驼纳米抗体开发为例）

服务项目	内容	周期
基因合成	基因模板合成，密码子优化，AAV载体构建	4-6周
动物免疫	标准免疫流程，ELISA测血清效价+FACS血清检测	10周
抗体筛选	羊驼采血，建库，筛选获得VHH抗体序列	4-6周
抗体生产	杂交瘤细胞生产，抗体纯化	可选

█ 泰克服务优势

-- 无需重组蛋白，无忧全长膜蛋白免疫，成本低（相比VLP），简便快捷

-- 离子通道蛋白，多次跨膜蛋白免疫

-- 生成具有高亲和力和特异性的抗体；

-- 靶点免疫特异性高，mRNA免疫抗原纯度高（相比细胞免疫）

DNA免疫抗体制备服务常见问题解答

DNA 表达的抗体产量较低，影响抗体的产量和活性。

优化 DNA 设计，包括选择适当的启动子、信号序列和表达载体；优化转染条件和培养条件，提高细胞内 DNA 的转录和翻译效率；采用增强型的表达系统，如改进的质粒构建技术或病毒载体。
DNA 表达的抗体可能无法正确折叠和组装，导致结构异常或失活。

优化 DNA 设计，确保 DNA 编码的抗体结构和序列符合正常折叠和组装的要求；使用适当的细胞系和培养条件，促进抗体的正确折叠和组装。
DNA 在细胞内易被降解，导致抗体的产量不稳定。

使用稳定性较高的 DNA 序列设计，如加入适当的启动子、终止子和增强子等；采用质粒稳定复制系统或选择稳定的细胞系，减少 DNA 的降解。
DNA 表达的抗体可能具有免疫原性，触发宿主的免疫反应。

选择合适的宿主细胞和表达系统，减少免疫原性；在设计 DNA 时避免含有免疫原性的序列或结构，如 CpG 富集区域等。

DNA 表达的抗体产量较低，影响抗体的产量和活性。

优化 DNA 设计，包括选择适当的启动子、信号序列和表达载体；优化转染条件和培养条件，提高细胞内 DNA 的转录和翻译效率；采用增强型的表达系统，如改进的质粒构建技术或病毒载体。
DNA 表达的抗体可能无法正确折叠和组装，导致结构异常或失活。

优化 DNA 设计，确保 DNA 编码的抗体结构和序列符合正常折叠和组装的要求；使用适当的细胞系和培养条件，促进抗体的正确折叠和组装。
DNA 在细胞内易被降解，导致抗体的产量不稳定。

使用稳定性较高的 DNA 序列设计，如加入适当的启动子、终止子和增强子等；采用质粒稳定复制系统或选择稳定的细胞系，减少 DNA 的降解。
DNA 表达的抗体可能具有免疫原性，触发宿主的免疫反应。

选择合适的宿主细胞和表达系统，减少免疫原性；在设计 DNA 时避免含有免疫原性的序列或结构，如 CpG 富集区域等。