纳米抗体免疫原制备3-纳米抗体专题-泰克生物-酵母展示服务专家

纳米抗体免疫原制备3

1993年，在骆驼科动物血清中发现了一种天然的缺失轻链（VL）的抗体，它的结构简单，仅由两条重链（VH）组成，它的体积很小，约为15 kDa，因此被称为纳米抗体或单域抗体，后来在羊驼和鲨鱼等动物中也发现了这种抗体。基于独特的结构和广泛的应用前景，纳米抗体制备有了广阔的应用市场，特别是在药物研发领域，由于纳米抗体的穿透性较强，因此它成为了治疗肿瘤疾病的理想选择，有助于提高药物的疗效并减轻副作用。虽然鲨鱼动物中也存在类似结构的抗体，但由于羊驼等动物易于养殖和免疫，并且利润较高，因此大多数纳米抗体开发都是通过羊驼免疫进行的。通过噬菌体展示技术可以进行纳米抗体文库构建，抗体库分为天然抗体库、免疫抗体库、合成抗体库以及半合成抗体库。

在进行动物免疫时使用的免疫原类型多种多样，病毒免疫原作为一种常用的免疫原类型，包括全病毒灭活疫苗、亚单位疫苗、病毒载体疫苗、mRNA疫苗。通过物理或化学方法将病毒灭活，其抗原性被保留，致病性被去除，全病毒灭活疫苗能够刺激机体产生免疫反应，但病毒需要完全被灭活，制备过程较为复杂。亚单位疫苗只使用了病毒表面蛋白作为抗原，因此这种疫苗的安全性较高，但在使用过程中需要添加佐剂去增强免疫效果。腺病毒、慢病毒等经过基因改造后被用作载体，目标抗原基因被插入到病毒基因组中，通过病毒复制和表达去诱导免疫反应的发生，病毒载体疫苗的免疫效果高效且持久，但其制备过程复杂，需要严格控制生物安全。编码病毒抗原的mRNA被直接导入细胞中，从而使细胞表达抗原并刺激免疫反应的发生，能够快速制备mRNA疫苗，但难度较高，需要确保mRNA的稳定性和递送效率。病毒类型的免疫原在传染病防控领域已经成为一大热点，高效、安全的病毒疫苗也被应用于多种疾病领域。

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Fig. 1 对 HIV-1 Env 和埃博拉 GP 中聚糖空孔的抗体反应

制备病毒免疫原的注意事项：

在制备全病毒灭活疫苗时，灭活方法的选择至关重要，后续可以通过细胞毒性测试和传染性测试去验证病毒是否已被完全灭活。在制备亚单位疫苗和病毒载体疫苗时，需要确保抗原在宿主细胞中正确表达，并且被高度纯化，因此合适的表达系统以及纯化技术是很重要的。在使用疫苗时，可以添加适当剂量佐剂去提高疫苗的免疫效果。

在制备免疫原时，需要确保病毒滴度时候能够达到可以提供足够的抗原刺激的水平，进而才能诱导有效的免疫反应。但病毒滴度如果过高可能会导致免疫反应过强，甚至引发疾病。因此需要在保证免疫效果的同时，将病毒滴度控制在安全范围内。相应地，免疫原的量也不宜过多，能够诱发免疫反应即可。此外，使用高纯度的免疫原可以减少非特异性反应，提高免疫应答的特异性。使用病毒免疫原去免疫动物所制备的抗体中和作用很强，能够结合病毒颗粒表面的抗原，阻止病毒与宿主细胞结合，从而阻断病毒进入细胞。并且抗体还可以通过其他机制发挥抗病毒作用，如介导免疫细胞吞噬和清除病毒颗粒、干扰病毒复制周期等，这些机制共同作用，病毒感染被有效抵抗。

泰克生物多年来致力于纳米抗体文库构建与纳米抗体文库筛选服务，有丰富的纳米抗体开发经验。基于我们成熟的抗体发现服务平台，每年都有数百个羊驼纳米抗体文库构建服务成功交付。泰克生物建立了一个完善的、成熟的纳米抗体制备服务平台。基于噬菌体展示技术，我们可以提供包括抗原设计、羊驼免疫、羊驼纳米抗体文库构建与筛选、活性功能验证等主要实验环节，并为客户提供高特异性和高亲和力的羊驼纳米抗体文库构建服务。并且我们会对纳米序列信息进行全方面分析并用多种实验验证，如EC50测定，亲和力分析，流式阻断验证等。我们拥有包括M13、T4、T7和λ噬菌体在内的多种噬菌体抗体文库构建平台，可满足客户的不同需要，提供个性化的单域抗体开发服务。泰克生物擅长构建不同类型的噬菌体展示文库，如免疫库、天然库、半合成库、合成库等。我们构建的纳米抗体库库容量庞大，可产生高亲和力的纳米抗体。我们可为客户提供包括pMECS、pComb3X和pCANTAB 5E等多种噬菌粒载体。我们有TG1大肠杆菌、 XL1-Blue和ER2738等菌种，经扩大培养后，可用于噬菌体侵染。我们构建的抗体库库容量庞大，可达10^9，具有较高的目的片段插入率高，有利于筛选出令客户满意的纳米抗体。我们还可根据客户需要，对筛选的纳米抗体进行表达与纯化。除原核表达系统外，我们还有各种的抗体蛋白的真核表达系统，如哺乳动物细胞、酵日细胞、植物和昆虫细胞表达系统等，可为客户生产制备高质量纳米抗体。